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"膜杰作"——四次跨膜蛋白Claudin18.2(HEK293 表达)

背景

Claudin18 三维结构(AlphaFold预测图)
Claudin蛋白家族由Furuse于1998 年首次发现,是一类存在于上皮和内皮紧密连接处的四次跨膜蛋白,其作用是维持控制细胞间分子交换的紧密连接,包含至少27个成员。Claudin18.2 作为Claudin 18的亚型之一,在正常组织中仅有限表达于胃黏膜的分化上皮细胞,而在胃癌、胰腺癌、胆管癌、卵巢癌和肺癌等多种恶性肿瘤组织中的表达水平显著提升,是目前为止Claudin家族中最受关注的靶点。靶向Claudin 18.2的药物类型包括单克隆抗体、双特异性抗体、ADC以及CAR-T疗法。
多次跨膜蛋白受限于细胞膜的表面积,且作为介导膜内外信息传递的主要工具之一,过表达的多次跨膜蛋白通常具有细胞毒性,因此即使重组表达的多次跨膜蛋白的表达量也远低于可溶性蛋白。此外,在提取和纯化的过程中需要筛选合适的去垢剂或脂分子来保持空间构象和蛋白活性,使得获得高纯度的具有天然构象和活性的多次跨膜蛋白非常困难。没有理想抗原Claudin18.2,大大限制了靶向Claudin18.2的药物及疗法开发。
为解决四次跨膜蛋白Claudin18.2难以获取完整构象的问题,ACROBiosystems利用VLP和膜蛋白-去垢剂技术平台成功研制出全长Claudin18.2-VLP完整表位Claudin18.2-DDM/CHS产品,维持了Claudin18.2蛋白的天然构象,经ELISA/BLI/SPR验证显示高生物活性,满足药物研发要求。同时,ACROBiosystems可提供Claudin18.2稳定细胞株,适用于基于细胞水平的药物开发及研究;针对Claudin18.2的高质量一体化SPR&BLI分子互作服务 ,可用于抗体筛选、表征、一致性评价, 充分满足药物研发的需求,助力抗体药物临床申报。
产品列表
分子 货号 产品描述 应用 订购/预购
Claudin18.2 CL2-H5547 Human Claudin-18.2 Full Length Protein-VLP (HEK293) 免疫/ELISA/SPR/BLI/细胞水平实验

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CL2-H5546 Human Claudin-18.2 Protein, His Tag (active membrane protein) 免疫/ELISA/SPR/BLI

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CL2-H82E3 Biotinylated Human Claudin-18.2 Protein, His,Avitag™(active membrane protein) 免疫/ELISA/SPR/BLI

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CHEK-ATP033 HEK293/Human Claudin-18.2 Stable Cell Line 细胞水平实验/质检放行检测

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VLP VLP-H52C5 Virus-Like Particle (VLP) isotype control VLP同型对照

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Buffer DC-11 200x DDM CHS buffer 200X去垢剂缓冲液

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Claudin18.2全系列产品

以下ELISA/SPR/BLI/FACS数据均可免费提供内部实验操作方法以供参考,点击申请Protocol即可获取。

全长
Claudin18.2-VLP
(CL2-H5547)
Claudin18.2-VLP
独特优势
全长Claudin18.2,具有天然完整构象
VLP中靶抗原丰度高于过表达细胞
可提高免疫原性
100-150 nm,可作为树突状细胞和噬菌体展示的最佳靶点
可用于免疫/ELISA/SPR/BLI/细胞实验/CAR阳性率检测
独家
Claudin18.2-DDM/CHS
(CL2-H5546 CL2-H82E3)
Claudin18.2-DDM/CHS
独特优势
具有天然完整的ECD活性表位
可精确定量
去垢剂DDM/CHS(DC-11)经工艺筛选,大大提高水溶性
提供生物素标记Claudin18.2(CL2-H82E3)
经验证蛋白活性良好,可应用于免疫/ELISA/SPR/BLI
高活性
Claudin18.2-稳定细胞株
CHEK-ATP033
Claudin18.2-稳定细胞株
独特优势
稳定性经过2个月传代验证
高活性经FACS验证
可用于免疫、细胞水平的抗体筛选
Claudin 18.2-VLP
验证数据1
全长Claudin18.2-VLP(CL2-H5547)经过电镜观测,确保其正确组装。
电镜结果
验证数据2
经ELISA验证,抗嵌合Claudin18.2单克隆抗体可与全长Claudin18.2-VLP(CL2-H5547)特异性结合。
ELISA

Immobilized Human Claudin-18.2 Full Length Protein-VLP (Cat. No. CL2-H5547) at 5 μg/mL (100 μL/well) can bind Monoclonal Anti-Chimeric Claudin-18.2 Antibody, Human IgG1 with a linear range of 0.8-3 ng/mL .

申请 Protocol

验证数据3
经SPR亲和力验证,全长Claudin18.2-VLP(CL2-H5547)可与抗嵌合Claudin18.2单克隆抗体特异性结合,响应信号高,亲和力常数为1.24 nM
SPR

Human Claudin-18.2 Full Length Protein-VLP (Cat. No. CL2-H5547) captured on CM5 Chip via Anti-Claudin-18.2 antibody can bind Anti-Claudin-18.2 antibody with an affinity constant of 1.24 nM as determined in a SPR assay (Biacore T200) .

申请 Protocol

Claudin18.2-DDM/CHS
验证数据1
经ELISA验证, Claudin18.2- DDM/CHS(CL2-H5546),可与抗嵌合Claudin18.2单克隆抗体特异性结合,线性区间为0.4-2 ng/mL
ELISA

Immobilized Human Claudin-18.2, His Tag (Cat. No. CL2-H5546) at 2 μg/mL (100 μL/well) on an Nickel Coated plate can bind Monoclonal Anti-Chimeric Claudin-18.2 Antibody, Human IgG1 with a linear range of 0.4-2 ng/mL (in presence of DDM and CHS) .

申请 Protocol

验证数据2
经SPR结合活性验证, Claudin18.2- DDM/CHS(CL2-H5546)可与抗Claudin18.2单克隆抗体特异性结合,亲和力可达3.55nM
SPR

Human Claudin-18.2, His Tag (Cat. No. CL2-H5546) captured on CM5 chip via anti-His antibody can bind Monoclonal Anti-Chimeric Claudin-18.2 Antibody, Human IgG1 with an affinity constant of 3.55 nM as determined in a SPR assay (in presence of DDM and CHS) (Biacore T200).

申请 Protocol

验证数据3
经BLI结合活性验证, Claudin18.2- DDM/CHS(CL2-H5546)可与抗Claudin18.2单克隆抗体特异性结合,亲和力可达1.55nM
BLI

Loaded Monoclonal Anti-Chimeric Claudin-18.2 Antibody, Human IgG1 on AHC Biosensor, can bind Human Claudin-18.2, His Tag (Cat. No. CL2-H5546) with an affinity constant of 1.55 nM as determined in BLI assay (ForteBio Octet Red96e).

申请 Protocol

验证数据4
不同批次Claudin18.2-DDM/CHS(CL2-H5546)经ELISA活性验证,批间一致性良好

ELISA

Human Claudin-18.2,His Tag (Cat. No. CL2-H5546) Batch-to-Batch Consistency (Validated by ELISA) (CV<10%)

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高活性Claudin18.2-稳定细胞株
验证数据
经FACS验证,Anti-Claudin18.2抗体可与HEK293/ Claudin18.2稳定细胞株(CHEK-ATP033)特异性结合。
Claudin18.2稳定细胞株

FACS analysis of cell surface expression of Claudin-18.2 on HEK293/Human Claudin-18.2 Stable Cell Line(Cat. No. CHEK-ATP033). 0.2 million of untransfected HEK293 cells (grey line ) and HEK293/Human Claudin-18.2 stable cells (red line ) were stained with 100 µL of the diluted solution of anti-Claudin-18.2 antibody, Human IgG1 ,washed and then followed by PE anti-Human IgG1 Fc antibody and analyzed with flow cytometry .

申请 Protocol

临床药物信息
英文名称 研发代码 研发阶段 公司 适应症 临床试验
Zolbetuximab GC-182; iMAB-362 临床三期 Ganymed 囊性淋巴管瘤, 实体瘤, 胃癌, 食道癌, 胃肠疾病, 疼痛, 胰腺癌, 腺癌 详情
Recombinant humanized anti-Claudin 18.2 monoclonal antibody (CARsgen) AB-011 临床一期 恺兴生命科技(上海)有限公司, 科济生物医药(上海)有限公司 实体瘤, 胃癌, 胰腺癌 详情
KD-022 (Nanjing KAEDI Biotech) KD-022; KD-182 临床一期 南京凯地生物科技有限公司 肿瘤 详情
LCAR-C18S CAR-T cell therapy LB-1904; LB1904 临床一期 南京传奇生物科技有限公司 胃癌 详情
Q-1802 Q-1802 临床一期 启愈生物技术(上海)有限公司 实体瘤 详情
Recombinant humanized monoclonal antibody MIL93(Mabworks) 临床一期 北京天广实生物技术股份有限公司 实体瘤, 肿瘤 详情
ATG022 ATG-022; ATG022 临床阶段不明 上海德琪医药科技有限公司 实体瘤 详情
M-108 M108; M-108 临床一期 实体瘤, 胃肠道癌症 详情
AMG-910 AMG-910 临床一期 安进 食道癌, 胃癌, 腺癌 详情
ASKB-589 ASKB-589 临床二期 江苏奥赛康药业有限公司 实体瘤, 胰腺癌, 腺癌 详情
QL-1779 QL-1779; QL1779 临床一期 齐鲁制药有限公司 实体瘤 详情
TJ-CD4B TJ-CD4B; ABL-111; TJ-CLDN4B; TJ-033721 临床一期 实体瘤, 食道癌, 胃癌, 食道腺癌, 胰腺导管癌, 转移癌 详情
CMG-901 CMG901 临床一期 康诺亚生物医药科技(成都)有限公司 实体瘤, 食道癌, 胃癌, 胰腺癌, 腺癌 详情
LM-302 LM-302; LM302 临床二期 礼来(上海)管理有限公司 实体瘤, 胃肠道癌症 详情
SYSA-1801 SYSA1801; CPO-102; SYSA-1801 临床一期 实体瘤 详情
Claudin18.2 (CLDN18.2) humanized monoclonal antibody(Mabspacebio) TST-001 临床一期 迈博斯生物, 杭州奕安济世生物药业有限公司 实体瘤, 胆管癌, 胃癌, 食道癌, 肿瘤, 肺癌, 胆囊癌 详情
LM-102 LM-102 临床二期 礼新医药科技(上海)有限公司 实体瘤 详情
NBL-015 NBL-015 临床一期 上海新石生物医药有限公司 实体瘤, 胃癌, 胰腺癌 详情
相关参考文献

Jumper J, et al. Highly accurate protein structure prediction with AlphaFold. Nature (2021)

Furuse M, et al. Claudin-1 and -2: novel integral membrane proteins localizing at tight junctions with no sequence similarity to occludin[J]. J Cell Biol(1998)

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