质量表征分析服务

以上市药物抗体分子量测定为例，比较SEC-HPLC和SEC-MALS的测定结果，我们用SEC-HPLC和MALS两种方法分别测定了OKT3、赫赛汀(Herceptin)和伊匹单抗(Ipilimumab)三种已知分子量的上市抗体药物。如Tab 1所示，三种抗体药物实际具有非常接近的分子量(150-160kDa)，但三者洗脱保留时间却有较大的差异，造成SEC-HPLC计算分子量大相径庭，其中OKT3抗体测定为212.5kDa， Ipilimumab仅为66.3kDa，和真实分子量相去甚远。而SEC-MALS检测三种抗体分子量和抗体理论分子量非常接近(Fig 2)。

由此可见，MALS技术测定蛋白分子量的结果较传统的SEC-HPLC更加准确可靠。

SEC-MALS可以进行糖基化、PEG修饰蛋白、膜蛋白等复合物组分测定，Fig 3所示为糖基化修饰蛋白复合物组分测定，蛋白复合物摩尔质量（黑色），复合物中蛋白组分摩尔 质量（红色），复合物中糖修饰的摩尔质量（蓝色）。

S蛋白是新冠病毒研究中最重要的靶标，在病毒表面以同源三聚体形式存在，当S1亚基中的RBD与宿主细胞ACE2结合后，引发三聚体不稳定性，造成S1亚基和S2亚基发生解离，S2亚基的构象变为高度稳定的融合后结构，因此S蛋白具有融合前(Prefusion)和融合后(Postfusion)两种构象。研究人员发现，S蛋白的构象形式很不稳定，即使不与宿主细胞受体ACE2结合， 也会自发出现由Prefusion到Postfusion的构象改变，这对疫苗开发和中和性抗体筛选带来巨大的挑战。