流感病毒来袭，你中招了吗？——查看流感疫苗研发关键试剂

据中国国家流感中心数据显示，2023年4月3日－2023年12月17日（以实验日期统计），A(H1N1)pdm09亚型流感病毒1829株（97.3%）为A/Victoria/4897/2022的类似株；A(H3N2)亚型流感病毒770株（47.3%）为A/Darwin/9/2021（鸡胚株）的类似株；760株（46.7%）为A/Darwin/6/2021（细胞株）的类似株；B(Victoria)系260株（96.7%）为B/Austria/1359417/2021的类似株。2023年第50周第783期中国流感监测周报最新数据显示，全国报告213起流感样病例暴发疫情，最近一周流感病毒毒株以A(H3N2)亚型为主，其次为B(Victoria)系。

流感病毒知多少

流感病毒属于正粘病毒科的RNA病毒，根据病毒核蛋白和基质蛋白，分为甲、乙、丙、丁（或A、B、C、D）四型（见表1）。甲型流感病毒根据病毒表面的血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）的蛋白结构和基因特性，可分为多种亚型。目前，发现的HA和NA分别有18 个（H1-18）和11个（N1-11）亚型。甲型流感病毒宿主众多，除感染人外，在动物中广泛存在，如禽类、猪、马、海豹以及鲸鱼和水貂等。乙型流感病毒根据HA基因型分为Victoria系和Yamagata系，既往多个流行季在人群中交替流行或混合流行。

流感病毒的分类

接种流感疫苗是预防和控制流感病毒感染及其严重并发症的有效手段，但由于流感病毒抗原的变异性，导致疫苗毒株与当年的流行毒株的抗原性并不完全匹配，造成流感疫苗的有效性降低，不能有效预防季节性和大流行流感，因此研发通用疫苗成为当前的主要趋势。

开发基于HA的流感疫苗的策略^[1]

血凝素（HA）介导病毒附着在唾液酸化的宿主细胞受体上，在感染过程中通过与膜的融合进入，其包括球状头部结构域和茎部结构域，HA诱导的特异性抗体具有中和作用。HA的高糖基化降低了对头部结构域的免疫应答，较低的免疫压力使HA茎部结构域与头部结构域相比相对保守。目前基于HA的通用流感疫苗研发策略主要有：保持HA完整结构，但毒株特异性的HA头部使用另一种更为保守的HA头部替换，从而开发出一种新的嵌合HA疫苗；或者去除头部结构，仅保留具有免疫原性的茎部；基于计算优化的广谱反应性抗原的HA 茎部和头部诱导特异性交叉反应抗体等。

NA特异性抗体抑制神经氨酸酶（NA）的机制^[2]

神经氨酸酶（Neuraminidase，NA）NA是流感病毒表面的一种四聚体糖蛋白，主要通过切割宿主细胞膜上的病毒唾液酸受体来促进病毒颗粒的释放并防止后代病毒在细胞表面的积累，从而在病毒传播中起重要作用。抗NA抗体可缩短流感病程并影响病毒传播。位于222~230个氨基酸残基之间的NA酶解位点在甲型和乙型流感病毒中高度保守。针对该表位的单克隆抗体可抑制N1~N9型流感病毒。Skarlupka 等人使用计算优化的广谱反应性抗原方法设计的含有4 种甲型流感病毒NA活性的N1疫苗抗原免疫小鼠，受致死性攻击后小鼠肺病毒滴度低，所有小鼠存活；该疫苗诱导产生的NA抗体能与N1 亚型的禽流感、猪流感和人流感病毒发生交叉反应，并具有中和活性。可见，NA是开发通用流感疫苗极具潜力的靶点。

单独使用NA或其保守表位结合HA构建疫苗可产生广泛的IgG抗体反应，但对T细胞反应诱导较差，不足以对异源甲型流感病毒产生保护作用。将NA与HA、M2e蛋白和佐剂结合构建疫苗可产生更好针对同源和异源病毒的保护效果，还能促进Th1/Th2平衡反应的诱导，同时增加对第1组和第2组流感病毒的中和广度。此外，McMahon等和Qiao等模拟并制备了以HA或其茎、NA、M2和NP的通用流感多表位疫苗，发现所有疫苗成分在单剂量给药后都能诱导抗原特异性细胞和体液免疫应答，观察到了显著HA、NA、M2抗体滴度增加和针对NP和M2的强大免疫应答。

ACROBiosystems流感疫苗研发解决方案

Hemagglutinin (HA) Trimer	Neuraminidase (NA) Tetramer
HAE-V52H3 (Victoria)	NEE-V5245 (Victoria)
HAE-V52H4 (Yamagata)	NEE-V5246 (Yamagata）
HA2-V52H5 (H3N2)	NEE-V5247 (H3N2)
HA1-V52H4 (H1N1)	NEE-V5248 (H1N1)
……	……

The purity of Influenza A [A/Darwin/6/2021 (H3N2)] HA Protein, His Tag (Cat. No. HA2-V52H5) is more than 90% and the molecular weight of this protein is around 225-255 kDa verified by SEC-MALS.

Immobilized Influenza A [A/Darwin/6/2021 (H3N2)] Hemagglutinin (HA) Protein, His Tag (Cat. No. HA2-V52H5) at 1 μg/mL (100 μL/well) can bind Human Anti-HA (H3N2) antibody CR8020 Human IgG1 with a linear range of 0.4-25 ng/mL (QC tested).

参考文献：

1.Li J, Zhang Y, Zhang X, Liu L. Influenza and Universal Vaccine Research in China. Viruses. 2022 Dec 30;15(1):116. doi: 10.3390/v15010116. PMID: 36680158; PMCID: PMC9861666.

2.Piepenbrink M S , Nogales A , Basu M ,et al.Broad and Protective Influenza B Virus Neuraminidase Antibodies in Humans after Vaccination and their Clonal Persistence as Plasma Cells[J].Mbio, 2019, 10(2).DOI:10.1128/mBio.00066-19.