炎症因子检测助力慢性阻塞性肺病（COPD）研究

COPD是一种进行性、异质性的炎症性肺部疾病，包括慢性支气管炎和/或肺气肿。全球有超过 3.9 亿人患有COPD，是导致死亡的第三大原因。COPD患者会出现呼吸困难、咳嗽、咳痰等持续性呼吸道症状，同时由于慢性炎症导致气流进行性阻塞，影响日常生活。

COPD 相关多种炎症通路，发病机制复杂，并非所有通路均特异于COPD（图1）。病毒、吸烟、细菌等通过氧化应激损伤气道上皮，促使释放警报素，此过程在伴2型及1/3 型炎症的COPD 中均存在，引发下游炎症，慢性持续可致气道重塑等，构成 COPD 临床表现。1/3 型炎症中，警报素促使树突状细胞诱导 Th0 细胞分化为Th1/Th17细胞，增强巨噬细胞活化，极化巨噬细胞释放细胞因子，与Th17细胞的IL-17共同刺激 MMP 生成、升高中性粒细胞。

图1. 与慢性阻塞性肺疾病相关的炎症通路具有多样性

值得注意的是，2型细胞因子在伴2型炎症的 COPD 中作用逐渐清晰，IL-4、IL-13、IL-5有独特及重叠作用（图 2）。IL-4 诱导初始 T 细胞分化为 Th2，还刺激嗜碱性粒细胞和肥大细胞脱颗粒；IL-13独特作用于杯状细胞增生和黏液分泌；IL-5独特活化骨髓嗜酸性粒细胞。IL-4和IL-13在B细胞类别转换等方面重叠，三者均刺激嗜酸性粒细胞向组织迁移。

图2 2型细胞因子在伴有2型炎症的慢性阻塞性肺疾病中的潜在作用

临床研究发现， COPD患者诱导痰中IL-6水平在急性加重期（AECOPD）显著高于稳定期（SCOPD），且与GOLD分级呈正相关，差异具有统计学意义，这些结果提示IL-6与COPD急性加重、气流阻塞程度相关，且可能关联患者的预后、并发症及死亡风险。另有研究显示，COPD患者痰液中IL-6水平显著高于血清。

同时， IL-8作为中性粒细胞趋化因子，通过启动和放大炎症反应参与炎症过程，已被证实是COPD急性加重及疾病进展的原因之一。高水平IL-8可引发过度炎症及组织损伤，且能反映COPD的气道炎症程度，是疾病早期诊断及病情评估的重要指标。研究结果显示，AECOPD患者诱导痰中IL-8水平显著高于SCOPD，且与COPD患者GOLD分级呈正相关，提示IL-8参与了COPD急性加重过程，并可反映气流阻塞程度。

COPD的发病机制十分复杂，至今没有被完全确认。通常认为，慢性炎症反应是最重要的发病原因之一，其中研究较多的是由Th2通路介导的嗜酸性粒细胞水平升高。基于这一路径，近些年也出现了不少免疫抑制靶向产品，比如靶向IL-4Rα、IL-5、IL-33、TSLP等。

为了加速这些领域药物的研发，ACROBiosystems可提供经过多种生物样本验证和即用型的Biomarker/Cytokine ELISA检测试剂盒。产品性能根据《生物样品分析方法验证 M10》在生物样本中全面验证，保证药物研发和临床实验分析结果的精确性、特异性、准确度、灵敏度和一致性。

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Human IL-8 ELISA Kit (CRS-B004)

☛ 回收率

将本产品（CRS-B004）中的参考品，用样本稀释液分别配置成高值血清样本，按照1：19的体积比例加标到血清样本中。按照试剂盒说明书，每个样本均检测2次，求出检测结果的浓度值的平均值。回收率的计算公式=（加标样本值-Blank样本值*0.9）/理论值×100%, 本产品回收率平均值为96.44%（见下表1）。

表1. CRS-B004回收率数据

☛ 真实样本值

在对人IL-8 ELISA检测试剂盒进行的真实样本值测定中，使用了240例健康人血清样本。240例样本的IL-8浓度检测测量值数据见图3：

图3. CRS-B004真实样本值数据图

☛ 线性范围

人IL-5 ELISA检测试剂盒的线性检测范围为1.95 pg/mL – 250 pg/mL。具体数据见图4.

图4. (a). CEA-C011试剂盒标准品线性检测数据(OD450nm-630nm); (b). CEA-C011试剂盒标准品四参数方程拟合线性图

☛ 回收率

将本产品（CEA-C011）中的参考品，用样本稀释液分别配置成高值血清样本，按照1：9的体积比例加标到血清样本中。按照试剂盒说明书，每个样本均检测2次，求出检测结果的浓度值的平均值。回收率的计算公式=（加标样本值-Blank样本值*0.9）/理论值×100%, 本产品回收率平均值为99.70%（见下表2）。

表2. CEA-C011回收率数据

Human TSLP ELISA Kit (CEA-C074)

☛ 回收率

将本产品（CEA-C074）中的参考品，用样本稀释液分别配置成高值血清样本，按照1：9的体积比例加标到血清样本中。按照试剂盒说明书，每个样本均检测2次，求出检测结果的浓度值的平均值。回收率的计算公式=（加标样本值-Blank样本值*0.9）/理论值×100%, 本产品回收率平均值为91.51%（见下表3）。

表3. CEA-C074回收率数据

☛ 真实样本值

在对人TSLP ELISA检测试剂盒进行的真实样本值测定中，使用了16例健康人血清样本。16例样本的TSLP浓度检测测量值数据见图5。

图5. CEA-C074 真实样本值数据

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