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【技术干货】出彩你的T细胞激活培养

2022-06-21 12:12    浏览量:978

ACROBiosystems自主开发了一系列高质量用于T细胞激活培养以及功能评价的相关产品,支持细胞治疗疗法、抗体药物开发。

T细胞激活:无菌、低内毒素CD3/CD28抗体偶联磁珠抗CD3抗体以及抗CD28抗体
T细胞培养:GMP级别IL-15IL-7IL-21等细胞因子。
功能评价:高灵敏细胞因子定量检测试剂盒




T细胞激活



ACROBiosystems

T细胞活化在机体免疫应答中处于核心地位,它的活化、增殖及分化需要双刺激信号,第一信号是TCR/CD3与抗原提呈细胞(APCs)表面特异的MHC分子抗原肽复合物结合产生的特异性抗原刺激信号;第二信号是非特异性的共刺激信号,由APCs表面多对共刺激分子和T细胞的相应受体相互作用后产生(如:CD28CTLA-4和CD80CD86, 4-1BB和4-1BBLCD40和CD40L,PD-1和PD-L1等),其中CD28是最为重要的共刺激分子,第二信号可使T细胞完全活化,分泌细胞因子和表达细胞因子受体。研究显示,T细胞的体外激活增殖在细胞治疗、免疫检查点等研究领域起重要作用。

细胞治疗疗法

CAR-TTCR-T疗法是目前过继性免疫细胞疗法的研究热点,无论是CAR-T还是TCR-T细胞的体外培养,T细胞都需要被激活后才能进行后续操作步骤,因此合适的T细胞激活试剂是开发细胞治疗药物的必需原料,目前市场上体外激活T细胞的方法主要有:使用可溶性抗体CD3/CD28抗体联合细胞因子如IL-2等进行刺激,使用结合在固相载体上的抗体CD3/CD28抗体偶联磁珠。可根据激活强度和后续残留检测等方面的考量,来选择合适的T细胞激活方案。

细胞治疗药物开发过程中T细胞的激活

图1 细胞治疗药物开发过程中T细胞的激活

免疫检查点药物

免疫检查点药物由于出色的临床疗效,成为肿瘤免疫治疗备受关注的焦点,针对免疫检查点的抗体药物更是免疫治疗的热点领域,成为医药巨头竞争的前沿阵地,抗体药的研发关键在于药效,但同时体外活性的研究也很重要,可以为体内药效提供早期的数据支持。目前用于免疫检查点抗体药物的体外活性研究方法主要集中于T细胞激活活性,可采用在PBMC培养板上包被CD3抗体,在上清中加入CD28可溶性抗体的方式激活T细胞,或通过CD3/CD28抗体偶联磁珠来激活,然后通过检测含有免疫检查点药物培养上清中细胞因子的含量变化,来反映药物对T细胞激活情况。

免疫检查点药物杀伤肿瘤细胞示意图

免疫检查点药物杀伤肿瘤细胞示意图


相关推荐产品


CD3/CD28抗体偶联磁珠

★ 5.5 μm大小,可更好地模拟APC,刺激T细胞

★ 磁性强,轻松分离,磁珠不易残留

★ 超低内毒素(< 2EU/mg),对T细胞无伤害

★ 经细胞水平验证,可高效激活扩增T细胞

CD3抗体CD28抗体

★ 无菌低内毒素(<2 EU/mg)

★ 无血清、无动物源、无任何外源因子

★ 高细胞活性:高效率激活刺激T细胞

★ 高稳定性和批间一致性


细胞因子检测试剂盒

★ 经细胞培养基及血清真实样本检测,基质干扰小

★  试剂盒标准品经WHO标准品NIBSC/WHO (87/586)进行校准

★ 可提供RUO及ClinMax两版本,满足研发及临床研究阶段需求

★ 可提供方法学验证报告,严格控制产品灵敏度、特异性、准确度,线性和批间/批内差


免疫检查点蛋白

★ 构象真实:MALS验证真实分子量和蛋白聚体结构

★ 高生物活性:经ELISA/SPR/FACS等验证

★ 应用场景广泛:免疫/中和抗体筛选/细胞功能验证




T细胞培养



ACROBiosystems
T细胞在经过第一、第二信号刺激完全活化后,还有赖于多种细胞因子(IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、IL-15和IFN-γ等)的作用才能进一步增殖活化培养,如果没有细胞因子,活化T细胞不能增殖和分化,导致T细胞的活化后凋亡。因此,在免疫细胞治疗产品的生产过程中,培养基补充剂如IL-15IL-7以及IL-21等细胞因子是TNK免疫细胞增殖分化的主要试剂,是免疫细胞治疗药物生产的关键原材料。值得关注的是,FDA和CDE对这些关键物料的使用均有相关规定,如FDA CMC建议使用FDA批准的或者临床级别的物料,国内规定使用的原材料要优先选择低风险级别的,比如建议使用GMP级的材料优于非GMP级。因此使用安全性、有效性以及符合规范的细胞因子对于免疫细胞治疗药物的成功研发和顺利申报上市至关重要。

CAR-T药物开发过程中需要细胞因子等培养用原料

图3 CAR-T药物开发过程中需要细胞因子等培养用原料


相关推荐产品



GMP级别细胞因子

★ GMP级别IL-15IL-7IL-21等细胞因子

★ 严格GMP质量管理体系

★ 高安全性(无菌,支原体,外源病毒,各项杂质残留检测)

★ 高稳定性和批间一致性

★ 完整的细胞/基因治疗产品申报支持文档




总结



ACROBiosystems
T细胞作为重要的免疫细胞,其体外的增殖培养、功能性相关研究在免疫细胞疗法,单/双抗等药物的开发过程中起关键作用,面对市面上多种多样T细胞培养相关试剂,如何选取安全的、符合规范的产品,对后续的药物开发和申报上市至关重要,为满足市场需求,ACROBiosystems开发了一系列经严格质量标准放行的T细胞激活培养用相关产品,全方位助力药物开发进程。




热门产品列表



配齐全套装备,全方位助力T细胞激活培养~

装备1CD3/CD28抗体偶联磁珠

免费申请试用装

装备2抗CD3抗体抗CD28抗体

点击咨询
装备3GMP级别细胞因子

免费申请试用装

装备4细胞因子定量检测试剂盒

免费申请试用装




验证数据



ACROBiosystems
细胞活性验证,抗CD3抗体抗CD28 抗体可高水平激活T细胞

高水平激活T细胞

Monoclonal Anti-Human CD3 Antibody, Mouse IgG2a (Clone: OKT3), Ultra-low endotoxin (Cat. No.CDE-M120a) stimulates proliferation of PBMC. The ED50 for this effect is 0.4077 ng/mL (QC tested).

点击申请Protocol

Anti-CD28 monoclonal antibody

Anti-CD28 monoclonal antibody, Mouse IgG1 stimulates secretion of IL-2 by PBMC stimulated with 2 ng/mL anti-human CD3 antibody (OKT3). The EC50 for this effect is 0.67-0.90 ng/mL (QC tested).

点击申请Protocol


✍与竞品相比,ACROAnti-CD3/CD28 Antibody-coupled Magnetic Beads,可对T细胞进行有效扩增,且有较高水平的扩增能力

ACROAnti-CD3/CD28 Antibody

The purified human T cells were stimulated using Anti-CD3/CD28 Antibody-coupled Magnetic Beads (Cat. No. MBS-C001) and competitor’s beads respectively. Cells were expanded in T cell culture medium supplemented with 4ng/mL of rhIL-2 Protein (Acrobiosystems, Cat. No. IL2-H4113). Activated Cells were expanded for up to 13 days (A) with high cell viability (B).

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✍ACRO GMP Human IL-15不同批次的细胞活性保持一致,具有高批间一致性。

高批间一致性的IL-15

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来自客户的声音



ACROBiosystems
很开心ACRO的产品能够真正帮助到大家,我们会继续努力,做出更优秀的产品,更好的服务客户,如果你也使用了ACRO的产品,欢迎留下你的产品评论,有机会获得星巴克咖啡券哦~  
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明星产品抗CD3 抗体(Cat. No. CDE-M120a)

用户评价ACRO

明星产品CD3/CD28抗体偶联磁珠(Cat. No. MBS-C001

用户评价百普赛斯

明星产品GMP 级IL-15细胞因子(Cat. No. GMP-L15H13)

用户评价ACRO细胞因子


参考文献

[1] Kay, J.E., 1991. Mechanisms of T lymphocyteactivation. Immunology Letters 29, 51 – 54

[2] 医学免疫学-第7版

[3] Trickett A, Kwan YL. T cellstimulation and expansion using anti-CD3/CD28 beads. J Immunol Methods. 2003Apr 1;275(1-2):251-5.

[4] Kalos M, Levine BL, Porter DL, KatzS, Grupp SA, Bagg A, June CH: T cells with chimeric antigen receptors havepotent antitumor effects and can establish memory in patients with advancedleukemia. Sci Transl Med 2011, 3:95ra73.

[5] Hollyman D, Stefanski J, PrzybylowskiM, Bartido S, Borquez- Ojeada O, Taylor C, Yeh R, Capacio V, Olszewska M, HoseyJ et al.: Manufacturing validation of biologically functional T cells targetedto CD19 antigen for autologous adoptive cell therapy. J Immunother 2009, 32:169-180.

[6] https://www.chromatographyonline.com/view/physicochemical-methods-for-vectors-and-ancillary-materials-in-cellular-and-gene-therapies


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