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生物素标记蛋白

生物素与亲和素/链霉亲和素的结合具有高度特异性和稳定性,两者的亲和常数比抗原-抗体反应高10-100万倍,是目前已知强度最高的非共价作用,这使得它成为蛋白质生物化学中的一个非常好的工具。然而,高质量的生物素标记蛋白的生产目前是一个重大的挑战。研究人员经常遇到的技术问题,包括不能充分标记,高批次间差异,和不可预知的性能表现。此外,生物素标记方法的选择也会显著影响最终的结果。每一个目标蛋白都有着自己独特的生化特性,因此需要定制化的解决方案。

这些复杂的因素使得个人实验室很难制造和使用生物素结合物,同时,很少有商业化的产品可供购买。为了填补这一空白,ACROBiosystems公司开发出了一系列独家的预先标记且经实验验证的生物素标记重组蛋白。MABSOL®生物素标记蛋白包含超过上百种常用的药物靶点和生物标志物蛋白。我们以高质量的人源细胞表达的蛋白为原料,每一步都经过充分考量,以达到最高的生物活性和检测灵敏度。我们还使用最严格的质量控制,以确保最小的批次间差异

MABSOL®生物素标记蛋白系列包括两个独特的互补产品系列,分别是建立在Avitag™技术上的PrecisionAvi系列(查看产品列表),和使用内部开发的化学标记法的UltraLys系列(查看产品列表)。具有严格的细节要求和质量检测标准。

PrecisionAvi系列

使用Avitag单点酶标标记技术的生物素标记蛋白

本系列产品是使用Avitag™技术专门生产的。简而言之,一条独特并有15个氨基酸的多肽和Avi标签被引入在进行表达载体构建的重组蛋白上。在Avi标签中的单一的赖氨酸残基被大肠杆菌生物素连接酶生物素化。

  • 生物素化发生在Avi标记的赖氨酸残基上,标记均一
  • 不影响蛋白的天然活性
  • 固定在亲和素包被表面的蛋白具有方向一致性

下列产品可提供预定服务:除常规产品外,下列尚在研发中的分子我们也接受预定。如需获取详细技术资料和价格请与我们联系

UltraLys系列

使用独特超高灵敏度的化学标记法标记的生物素标记蛋白

UltraLys系列由优化设计的化学标记法生产。蛋白质N端的游离胺基及内部的赖氨酸侧链上的胺基都能与生物素分子结合,通常一个蛋白质分子会被标记上多个生物素分子。

  • 较高的检测灵敏度
  • 标记方法简单

产品特征

高质量的人源细胞表达蛋白

ACROBiosystems生物素标记蛋白的生产采用我们独家的HEKMax®表达平台进行。作为表达源,人体HEK293细胞比其他类型的细胞有着诸多优势。

高生物活性和检测灵敏度

生物素标记蛋白的生物活性由蛋白自身结构和生物素标记方式决定。对于每一个蛋白,我们都测试了多种标签和生物素标记方法,用多种结合实验进行产品评估,只选择表现最好的蛋白进行生产。图1为内部评估实验举例。

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图 1. 功能性ELISA检测不同形式的Biotinylated PD1和rhPD-L1(Cat. #PD1-H5258)的结合能力,评估结合活性。

我们的生物素标记蛋白具有高生物活性和极好的检测灵敏度。图2可看到,SPR实验中,Biotinylated FcRn/FCGRT&B2M(Cat. #FCM-H82W4)耦联到SA包被的芯片上,结合Herceptin的亲和常数是2.24μM。图3中,通过功能性ELISA,Biotinylated VEGF165(Cat. #VE5-H8210)能够和固定的rhVEGFR2结合,EC50值0.5-5ng/mL。

图 2. SPR实验中,Biotinylated human FcRn/FCGRT&B2M,Avi Tag(Avitag™)(Cat. # FCM-H82W4)耦联到SA包被的芯片上,结合Herceptin的亲和常数是2.24μM(Biacore 2000)。数据由Biaffin GmbH &Co KG, Germany提供。
图 3. Biotinylated VEGF165(Cat. # VE5-H8210)与固定的rhVEGFR2结合的ELISA实验结果。

高批间一致

我们具有严格的质量控制措施,确保产品一致性。新产品会通过多种实验方法与我们内部标准进行并行对比,只有差异在可接受范围内的产品才会被放行。就像图4.ELISA分析对比三个不同批次Biotinylated hTNF-alpha(Cat. # TNA-H82E3)和Adalimumab的结合,0.5µg/孔Adalimumab包被在板上,结果显示这些样品间批次间差异可忽略。

靶点抗原:Biotinylated hTNF-alpha(Cat. # TNA-H82E3).
抗体 : Adalimumab (Humira®, Lot# 63169XH02, AbbVie Inc.)
图 4. ELISA分析对比三个不同批次Biotinylated hTNF-alpha(Cat. # TNA-H82E3)和Adalimumab(5ug/ml)的结合。结果显示这些样品间批次间差异可忽略。

部分引用文献

Integration of a CD19 CAR into the TCR Alpha Chain Locus Streamlines Production of Allogeneic Gene-Edited CAR T Cells

Authors: MacLeod DT et al.

Journal: Mol Ther 2017

Product: biotinylated Human CD19(Cat. # CD9-H8259

Application: Flow Cytometry

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Quantification of active infliximab in human serum with liquid chromatography-tandem mass spectrometry using a tumor necrosis factor alpha -based pre-analytical sample purification and a stable isotopic labeled infliximab bio-similar as internal standard: A target-based, sensitive and cost-effective method

Authors: El Amrani M et al.

Journal: J Chromatogr A 2016

Product: biotinylated human recombinant TNF-alpha(Cat. # TNA-H8211

Application: ELISA

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ANTIBODY-DRUG CONJUGATE HAVING IMPROVED STABILITY AND USE THEREOF

Authors: Kim Young Min et al.

Journal: United States Patent Application 20160136300 2016

Product: ErbB2(Cat. # HE2-H822R

Application: ELISA

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A simplified procedure for antibody engineering by yeast surface display: coupling display levels and target binding by ribosomal skipping

Authors: Grzeschik J et al.

Journal: Biotechnol J 2016

Product: EpCAM(Cat. # EPM-H8223

Application: Flow Cytometry

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Microsphere-based immunoassay integrated with a microfluidic network to perform logic operations

Authors: Pooja Sabhachandani et al.

Journal: Microchimica Acta 2015

Product: biotinylated human TNF-α(Cat. # TNA-H8211

Application: Microsphere-based assay

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The Shark Strikes Twice: Hypervariable Loop 2 of Shark IgNAR Antibody Variable Domains and Its Potential to Function as an Autonomous Paratope

Authors: Zielonka S et al.

Journal: Marine Biotechnology 2015

Product: CD3 epsilon(Cat. # CDE-H8223

Application: FACS sorting

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NOVEL CELL LINE SCREENING METHOD

Authors: YU et al.

Journal: United States Patent Application 20140155285 2014

Product: biotinylated TNFα(Cat. # TNA-H8211

Application: Flow Cytometry

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